Прочетен: 52792 Коментари: 48 Гласове:
Последна промяна: 27.11.2009 14:53
Тук ще проследя етапите от изолирането на стволови клетки от бластоцист. Експеримента започнах преди няколко дни и с течение на времето ще допълвам нови неща.
Каква е идеята накратко. Култивират се ин витро ембриони до фаза бластоцист в среда за стволови клетки съдържаща Lif (Leukemia inhibitory factor) и фибробласти . Ембрионите се прикрепват към слоя фибробласти, а средата промотира разрастването на вътрешната клетъчна маса (ICM - inner cell mass). След трипсинизиране, дисоциираните клетки се прехвърлят в ново петри със същата среда и образуват колонии от стволови клетки.
1. Подготовка за изолиране на преимплантационни ембриони.
Няма да се спирам в подробности на техниките за изолиране на преимплантационни ембриони, надявам се да имам време да го направя в отделен постинг, но в общи линии процедурата е следната. Кръстосвате мишки от избраната от вас линия. Три дни след това убивате хуманно женската и отпрепарирвате овариума, овидукта и утеруса. Промивате овидукта с M2 среда (на Sigma) и събирате ембрионите, които би трябвало да са във фаза морула (Е 2.5). Премествате ги с помощта на стъклена пипета в среда за култивиране (KSOM, FHM, M16, GM501 - culture) и CO2 инкубатор (10% CO2, 37 градуса С). Култивирате ги до фаза компактизирана морула или бластоцист.
2. Премахване на зона пелуцида.
Тази стъпка е опция. Има своите предимства и недостатъци.
а) Предимства. Ин витро култивирания бластоцист във фаза Е4.5 се освобожава сам от зона пелуцида, но това не правило, което се случва винаги. Ако не се освободи, ембриона умира и не се прикрепя към фибробластите. В нова статия побликувана в Cell, авторите твърдят, че премахването на зона увеличва извличането на стволови клетки до 80% .
б) Недостатъци. Премахването на зона пелуцида се осъществява чрез субстанция от соли с високо pH, нар. Tyrode`s solution (Sigma), която може да увреди ембрионите, ако останат по-дълго в нея.
Премахване на зона чрез Tyrode`s solution. Необходимо ви в четири ямково петри. В една ямка слагате 100 - 150 микролитра среда GM501 Air и прехвърляте ембрионите там. В друга ямка отпипетирвате същия обем Tyrode`s solution. Другите две ямки ги пълните с М2 среда (или GM501 Air). Прехвърляте 3 - 4 ембриона в Tyrode`s solution, фокусирате на бинокуляра зона и ноблюдавате постоянно за промени. Първоначално периветелинното протстранство (между ембриона и зона) ще се разрастне, след това ще се случи обратния процес - зона ще се свие плътно до ембриона и накрая ще изчезне. В този момент преместете ембриона веднага в първата ямка с М2 среда и след това във втората за да промиете ембриона. След това преминете към стъпка 3.
Изчезването на зона в Tyrode`s solution може да е от 2-3 до 10 минути. Ако зона не изчезва използвайте нова капка с Tyrode`s solution. Внимавайте да не внесете много от средата с ембрионите, това променя pH на Tyrode`s solution и спира реакцията.
3. Трансфер на ембрионите в среда за култивиране на стволови клетки.
Необходими са ви 96 ямкови плаки покрити с фибробласти. Премахвате средата за култивиране на фибробласти и я заменяте с такава за култивиране на стволови клетки. Прехвърляте всеки ембрион в отделна ямка. Средата за стволови клетки е следната: 400 мл DMEM (Biochrom, Gibco), 75 ml 10% FCS (Gibco), oт 1000x stock: 5 ml Penicillin / Streptomici, 5ml L-Glutamine, 5ml Piruvate, 5ml Non essential amino acids; 3,5 μl β-mercaptoethanol, 1000 U Lif.
4. Разрастване на вътрешната клетъчна маса (ICM – inner cell mass).Три – четири дни след прикрепване не бластоциста към фибробластите, вътрешната клетъчна маса се разраства, а трофектодермата се диференцира в т.нар. гигантски клетки (Giants cells), които мигрират. На този етам трябва добре да трипсинизирате клетките и да ги прехърлите в нова ямка с фибробласти.
Individual steps of mESC derivation. (a) MEF feeder layer at low
(insufficient) and proper density. (b) Morphology of mouse E3.5 blastocyst
with inner cell mass (icm) indicated. (c–e) Blastocyst hatched on MEF feeder
2 d (c), 3 d (d) and 4 d (e) after extraction. (f) Examples of hatched
blastocysts with expanded ICM and defined ESC like population (arrows),
ready for the first trypsinization at day 5 or 6 after extraction. The blastocyst
shown gave rise to ESCs. (g) Morphology of mESC-like colony 2 d after the
first trypsinization. (h) Typical appearance of mESC colony at the stage when
it should be subjected to the second trypsinization (usually 4–5 d after the
first trypsinization). (i) Established mESC line. The pictures were taken with
an Olympus C7070 camera. Scale bars, 50 mm (a), 25 mm (b–i).
07.07.2011 03:17
<b><a href=http://3bogatirya.ru/multfilmyi/tri-bogatyirya-i-shamahanskaya-tsaritsa/?replytocom=1257>царевна лягушка фильм порно онлайн</a></b>
Ждём мультфильм
<b>Иван Царевич и Серый Волк</b>
<a href=http://3bogatirya.ru/>http://3bogatirya.ru/ </a>
http://www.youtube.com/watch?v=AqoVkj-ixss&feature=player_embedded
08.07.2011 15:13
10.07.2011 15:15
Однако наша организация является приятным исключением из этого неприятного правила. Мы вот уже несколько лет занимается отделкой офисов, комнат, загородных домов и еще ни разу нам не приходило от наших клиентов ни неприятных отзывов, ни каких-либо жалоб. <a href=http://remroom.ru>ремонт своими руками квартиры видео</a> Большой опыт наших специалистов, а также высокий профессионализм всех без исключения наших работников, поможет сделать хорошо, качественно и – главное - доступно как косметический, так и капитальный ремонт. <a href=http://remroom.ru>рабочие ремонт квартиры</a> Современное оборудование, новые технологии планировки и дизайна, а также индивидуальный подход к каждому клиенту и гибкая система скидок сделали нашу фирму самой успешной на сегодня компанией, оказывающей услуги ремонту и отделке помещений, комнат или дач. <a href=http://remroom.ru>комплексный ремонт квартир</a>
23.07.2011 01:42
<a href=http://www.pharmacyreviewer.com/?q=Tramadol&option=com_medicine&view=search>Tramadol without prescription</a>
25.07.2011 11:26
Позвольте посоветовать всем вам <a href=http://ehh.ru>ресурс с развлечениями, а также смешными комиксами</a>, отличное настроение, а кроме того красивая смех вас не оставят до конца дня.
03.08.2011 22:05
05.08.2011 08:34
10.08.2011 02:26
10.08.2011 08:11
<a href=http://xymeby.wordpress.com>электронная сигарета pons slim на сколько хватает зарядки</a>электронная сигарета отзывы запрет к продаже в америка
<a href=http://ubumoq.wordpress.com>электронная сигарета ташкент</a>электронная сигарета kr808d-1
<a href=http://lemocix.wordpress.com>электронная сигарета понс купить в санкт-петербург</a>электронная сигарета заправка
<a href=http://fyxyhobeg.wordpress.com>электронная сигарета фреш купить в москве</a>электронная сигарета томск
<a href=http://atimoni.wordpress.com>Доставка электронных сигарет</a>Электронные сигареты попробовать
<a href=http://kufatu.wordpress.com>электронная сигарета стоимость москва</a>электронная сигарета купить запорожье
<a href=http://gaxicovul.wordpress.com>электронная сигарета это</a>электронная сигарета winning
<a href=http://zotonetiny.wordpress.com>электронная сигарета цены как пользоваться</a>электронная сигарета вредна для окружающих
<a href=http://yguzyrojam.wordpress.com>электронная сигарета где купить в кмв</a>электронная сигарета видео пособие
<a href=http://saheseb.wordpress.com>электронная сигарета новосибирск</a>электронная сигарета 510
<a href=http://puturugu.wordpress.com>электронная сигарета в спб в г пушкин</a>электронная сигарета купить красноярск
<a href=http://nevevek.wordpress.com>электронная сигарета цена картриджа</a>электронная сигарета fresh
<a href=http://fogusuq.wordpress.com>электронная сигарета стоимость в саратове</a>электронная сигарета рак
<a href=http://owimojiwi.wordpress.com>электронная сигарета с дозатором капель</a>электронная сигарета цена харьков
<a href=http://hityfyqy.wordpress.com>Качественные электронные сигареты</a>электронная сигарета г.черновцы
<a href=http://lijosowu.wordpress.com>электронная сигарета купить магазин</a>электронная сигарета отзывы
<a href=http://jyzicu.wordpress.com>электронная сигарета цены в ставрополе</a>электронная сигарета отзывы медицина
<a href=http://axukevuwym.wordpress.com>электронная сигарета евросеть</a>электронная сигарета не заряжается
<a href=http://egigixobeh.wordpress.com>электронная сигарета иваново</a>Какую электронную сигарету выбрать
<a href=http://asofobik.wordpress.com>Электронная usb сигарета</a>электронная сигарета пачка сигарет купить в москве
<a href=http://ezegenux.wordpress.com>электронная сигарета md</a>электронная сигарета купить луганск
<a href=http://yqugenyq.wordpress.com>электронная сигарета украина кривой рог</a>электронная сигарета пачка сигарет купить в москве
<a href=http://qelucowot.wordpress.com>электронная сигарета colibri micro</a>электронная сигарета pons
<a href=http://odaweno.wordpress.com>электронная сигарета его</a>Электронные сигареты мнения врачей и покупателей
<a href=http://gewukeg.wordpress.com>электронная сигарета заправка</a>Фильтры для электронных сигарет
<a href=http://genydi.wordpress.com>электронная сигарета 901</a>электронная сигарета jsb
<a href=http://liteqin.wordpress.com>электронная сигарета fresh classic</a>электронная сигарета минск
<a href=http://izaneqoh.wordpress.com>электронная сигарета vgo black</a>Картриджи для электронных сигарет
<a href=http://yzyfez.wordpress.com>Где купить электронные сигареты</a>электронная сигарета тюмень
<a href=http://yjukeke.wordpress.com>электронная сигарета vgo</a>Типы электронных сигарет
<a href=http://ucuzoloqus.wordpress.com>электронная сигарета магазин в москвем.савеловская</a>электронная сигарета купить комсомольск на амуре
<a href=http://omefoxojy.wordpress.com>электронная сигарета njoy</a>электронная сигарета купить москва
<a href=http://pokujaveze.wordpress.com>электронная сигарета ростов-на-дону пр нагибина</a>электронная сигарета астана
<a href=http://ovoqaqyceq.wordpress.com>электронная сигарета инструкция к применению</a>электронная сигарета донецк продажа
<a href=http://ywunuf.wordpress.com>электронная сигарета джой 302</a>электронная сигарета понс найти в таганроге
<a href=http://tizykitoh.wordpress.com>электронная сигарета safe fashionable heaithy</a>электронная сигарета e-health
<a href=http://yboqafop.wordpress.com>электронная сигарета минск</a>Каталог электронных сигарет
<a href=http://ojepafu.wordpress.com>электронная сигарета и ее использование</a>электронная сигарета отрицательные отзывы
<a href=http://rajojahady.wordpress.com>электронная сигарета tornado</a>электронная сигарета t-fumo
<a href=http://ibudabemah.wordpress.com>электронная сигарета набор</a>электронная сигарета купить в самаре
<a href=http://ewakobanad.wordpress.com>электронная сигарета screwdriver</a>электронная сигарета продажа в минске цены
<a href=http://ezexyko.wordpress.com>Кому и где запрещены электронные сигареты</a>электронная сигарета парктроник
<a href=http://hexyjyku.wordpress.com>электронная сигарета украина</a>электронная сигарета купить цена
<a href=http://ozysecuha.wordpress.com>электронная сигарета ego</a>электронная сигарета нижневартовск
<a href=http://ujogelodu.wordpress.com>электронная сигарета с емким аккумулятором</a>электронная сигарета вреднее обычной
<a href=http://kywydobut.wordpress.com>Правда об электронных сигаретах</a>электронная сигарета pons спб
17.08.2011 20:05
http://w717.com
Все 11 видов рекламы = 1 $ за 1000 Уникальных переходов.
И 10-ки тысяч Показов за эти деньги.
По Грузии, Узбекистану 1000 уник. переходов,кликов =0,10$
BodyClick,Banner,PopUp.
Спешите купить Рекламу.
Пользователей: 245
Площадок: 253
Выплачено: 1078.44$
Показов за сутки: 675194
http://w717.com
---
http://izovol.in
Стройматериалы, Изовол ( Izovol. Isover) и мн. другое.
Лампы энергосберегающие,светодиодные в Москве.
Нужны Дилеры. Условия Супер!!
------
Фотоуслуги в Киеве. Настя
Портрет.Свадьба. Детки.Портфолио и др.
Посмотреть работы на сайте
http://fotokiev.org
-----------
Промышленный Аукцион.
http://1541.ru
Каталог Сайтов. Уже 100 000
ПРОДАМ
+380503225153
Шлиф. SZ22( SZ 22).
SXZ 2200 х 6000мм.
Coburg
6М610
6М612
Зубофрез.RF 6 000мм mod 70.
5А3288А
526
5А326 2шт.
6650
УФО 12х4х4м.
BFP160
СТ872
РТ263100
3М196.
-
Краны: КС50-42Б. КПМ 32
-
Продажа в Украине.
Емкости 9,10,16,20,25 кубовые из нержавейки, эмаль, титан,химические.
Емкости:
10-2 шт. -
16-45 шт.-эмалир.
24-7шт. т. эмалир
50- 2 шт. гориз.с мешалками эмалир.
27-12 шт.не эмалированные 15 мм толщина
Реакторы 6,3 м3, Эмаль
Титановый реактор.
Пресс ВП-20,виноградный.
Силос мучной ,Обьем 50 м3,
Стекатели виноградные,двухшнековые новые -- 10 шт,
Емкость химическая, СЭРН-25,
Эл,станция 200 квт,
Линия газводы
Компрессор водородный
Подробно и фото на сайте
http://1541.ru
-
Покупаю в Украине емкости нержав., эмалированные. Или ПОМОГУ продать
050-322-51-53
-
Эл.двиг.СТД-3150, 6кВ. 10кВ.
Трансф:ТМН 6300/35/6, ТДН 10000/110/6
-
Насосы Д6300
-
Куплю станки 5к328,5к328а,5а342п,528с,525,5м150,2а637ф1,5м161,sz-16,sz-22
Емкости нержав. и др.
----
Ремонт, модернизация, обслуживание Кранов всех типов ( кроме авто ).
Все на сайте http://1541.ru
--
01.09.2011 21:51
_________________
Он лежал на асфальте, а его правая рука обернулась ладонью вверх. Как если бы убитый перед смертью решил обратиться к небу за подаянием. Последним что он почувствовал, были капли дождевой влаги на лице. Одна попала в рот и он ощутил ее вкус. Пронзительный вкус сырости и детства
03.09.2011 04:35
-
11 видов рекламы:
http://w717.com
Реклама себе, друзьям и заработок на тех,кто не знает что это.
Купил рекламу за 1 доллар -продал за 2-3..
http://w717.com
Все 11 видов рекламы = 1 $ за 1000 Уникальных переходов.
И 10-ки тысяч Показов за эти деньги.
По Грузии, Узбекистану 1000 уник. переходов,кликов =0,10$
BodyClick,Banner,PopUp.
---
http://izovol.in
Стройматериалы, Изовол ( Izovol. Isover) и мн. другое.
Лампы энергосберегающие,светодиодные.Москва. в Москве.
Нужны Дилеры. Условия Супер!
--
Продаю станки,пресса 3537, 2436,3535?,1А660,5с328,6м612,6м610 и др.
Уникальные Насосы. Нержав. емкости.Краны. Насосы.
http://1541.ru
Покупаю б.у. старые станки СССР и импорт,
Оборудование старое мет.обрабатывающее и металлургическое
Или любое Уникальное, редкое,дорогое.
Продам Ваше. Было бы интересно..
18.09.2011 13:56
-
11 видов рекламы:
http://w717.com
Реклама себе, друзьям и заработок.
Купил рекламу за 1 доллар -продал за 3-9.
---
http://izovol.in
Стройматериалы, Изовол ( Izovol. Isover) и мн. другое.
Лампы энергосберегающие,светодиодные.Москва. в Москве.
Нужны Дилеры. Условия Супер!
--
Продаю станки BFT125, BFT90,1А660,5с328,6м612,6м610,пресс 3537 и др.
Уникальные Насосы. Нержав. емкости.Краны.
http://1541.ru
Покупаю б.у. старые станки СССР и импорт,
Оборудование старое мет.обрабатывающее и металлургическое
Или любое Уникальное, редкое,дорогое.
ПОМОГу Продать Ваше в Украине.
26.09.2011 05:33
27.09.2011 12:58
02.10.2011 01:18
Посетить наш ресурс можно по ссылке <a href=http://bezprovolo4ek.ru/>www.bezprovolo4ek.ru</a>
03.10.2011 05:28
Подробнее на сайте <a href=http://naukalife.ru/>www.naukalife.ru</a>
03.10.2011 08:02
Accept to Lieutenant Direct- the coming of television.
<b><a href=http://www.live-tv-show.com/>watch online movies for free</a></b> and <b><a href=http://live-tv-show.com/>watch true blood free online</a></b>
With no dues services or monthly bills, no munitions to put, and 24/7 myriad access, is it any trip that Internet Media Periodical hailed Follower Mail as “unequivocally the upper-class TV to PC software on the sifter”? Don’t be fooled nearby other so called “Mammoth Deals” on attendant goggle-box service in place of your PC that donate you only predetermined access to channels, or be struck by dozens of unseen fees that end up costing you more than your drift cablegram service.
Towards less than the value of a given month’s cost mooring or acolyte aid, you can charge out of a lifetime of television- greater than 3,500 channels!- from the convenience of your laptop or desktop. And ignore the hassles of waiting with a view introduction, or hours on proffer with the mooring company. Installing Lieutenant Administer is as informal as 1, 2, 3.
1. Roll - Response a two clear questions, and our easy registration system will-power answer your THE SAME EVERY SO OFTEN payment. That’s auspicious, no monthly bills- ever.
2. Download - Adhere to the easy as pie, on screen instructions to download our software. No hardware to put, no accoutrements to buy.
3. Keep safe and Dig - Meet back and fancy thousands of telly channels, from soaps and sports to movies and dramas, any continually, day or night.
With crystal cleanly paint and lucid blue blood, aberrant character advice, and a lifetime of television for less than you’d benefit into unprejudiced one month of mailgram care, Disciple Head up is the first character to get the most as a replacement for your TV dollar.
17.10.2011 12:14
24.10.2011 01:15
28.10.2011 10:33
29.10.2011 04:19
-
Оплата договорная.
-
Реклама разовая или постоянная.
Можете сделать это сами. Расскажу как.
--
При необходимости - сделаем фотосессию товара, объекта и прочего.
-
Посмотреть продажи можно на сайте.
http://1541.ru
-
По всем вопросам пишите на адрес:
z1017@mail.ru
тел. +38050-322-51-53 Евгений Иванович.
Звонить в любое время.
Украина.
29.10.2011 04:19
-
Оплата договорная.
-
Реклама разовая или постоянная.
Можете сделать это сами. Расскажу как.
--
При необходимости - сделаем фотосессию товара, объекта и прочего.
-
Посмотреть продажи можно на сайте.
http://1541.ru
-
По всем вопросам пишите на адрес:
z1017@mail.ru
тел. +38050-322-51-53 Евгений Иванович.
Звонить в любое время.
Украина.
10.11.2011 00:43
10.11.2011 06:14
16.11.2011 11:24
Продам Безалкогольный напиток «DR.Pepper».ОПТ. Нужны Дилеры
Цена 1 баночки 5 грн с НДС.
--
Объем баночки = 355 мл.
Продажи от 1-ой коробки.
http://1541.ru/cms/203/index.php
-
http://1541.ru
Каталог сайтов. Уже 100000
-
Биржа рекламы T&M.
http://w717.com
19.11.2011 01:00
Пенсионерам скидки. Гарантия. Подробности на сайте http://oooten.ru или по телефону +7 (495) 364-72-93
23.11.2011 08:31
27.11.2011 09:34
Изделия из серебра, Нумизматика, Предметы обихода, Профессии, Скульптура и статуэтки, Техника и приборы, Ювелирные украшения,
Букинистика, Венская бронза, Живопись и графика, Иконы, Ковры, Мебель и интерьер. Ждем Вас на нашем сайте http://antique-modern.ru.
8 (495) 606-44-45, 8 (903) 711-65-60
30.11.2011 02:37
http://1541.ru
Помогу БЕСПЛАТНО продать Ваш почти любой ликвидный товар..
Металлообрабатывающие оборудование: станки, прессы, молоты, гильотины, вальцы и другое.
Бывшее в употреблении ( Б,У,). с хранения, Целое и пограбленое по эл. части.
Химическое Реакторы и прочее. Не бывшее в работе, Б.у.
Спецтехнику. Ж.д. и другие Краны. Подшипники.
Медицинское, Пищевое, Металлургическое оборудование и прочее и прочее....
Напишите, позвоните и определимся.
Если у Вас есть желание быстрее продать любой Ваш Ликвидный товар,
высылайте точную модель, год, состояние, цена желаемая ( торговаться будет сами ), город местонахождения.
Рекламирую и быстро продаю только то, что принадлежит лично Вам или находится рядом с Вами.
Ваши ФИО, телефоны, имя фирмы обязательны.
Страна значения не имеет.
01.12.2011 03:50
[url=http://www.emporymeate.goclickhost.com/smotret-film-znakomstva-s-fakerami2.html]Смотреть фильм знакомства с факерами2[/url]
[url=http://www.arciz.web4free.org/znakomstva-v-uralske-kazahstan.html]Знакомства в уральске казахстан[/url]
[url=http://www.berezne.allwebsitesfree.com/sayt-znakomstv-g-ivanovo.html]Сайт знакомств г иваново[/url]
[url=http://www.sbeco.aptekaon.in/vakansii-v-ekaterinburge-dlya-shkolnikov.html]Вакансии в екатеринбурге для школьников[/url]
[url=http://www.aale.aptekaon.in/znakomstva-sving-besplatno.html]Знакомства свинг бесплатно[/url]
[url=http://www.exellcauche.byshare.net/znakomstva-v-arhangelske-po-telefonu.html]Знакомства в архангельске по телефону[/url]
[url=http://www.tacl.aptekaon.in/luchshie-hristianskie-znakomstva.html]Лучшие христианские знакомства[/url]
[url=http://www.qywbh.aptekaon.in/vakansii-massajista-v-krasnodare.html]Вакансии массажиста в краснодаре[/url]
[url=http://www.wxk.aptekaon.in/intimnie-znakomstva-peterburg.html]Интимные знакомства петербург[/url]
[url=http://www.bfhqr.aptekaon.in/mujskaya-rabota-1-smotret-onlayn.html]Мужская работа 1 смотреть онлайн[/url]
[url=http://www.alchevsk.free4webhost.com/sluzhba-znakomstv-v-arhangelske.html]Служба знакомств в архангельске[/url]
[url=http://www.buryn.kuncihost.net/seks-znakomstva-g-balakovo.html]Секс знакомства г балаково[/url]
[url=http://www.dsj.aptekaon.in/sayt-znakomstv-g-omsk.html]Сайт знакомств г омск[/url]
[url=http://www.dvwdo.aptekaon.in/index.html]водоканал вологда вакансии[/url]
[url=http://www.itxgg.aptekaon.in/parad-vakansiy-ygo-vostok-gazeta.html]Парад вакансий юго восток газета[/url]
[url=http://www.ikmws.aptekaon.in/taksi-maksim-vakansii.html]Такси максим вакансии[/url]
[url=http://www.cqk.aptekaon.in/flirtyou-net-sayt-znakomstv.html]Flirtyou net сайт знакомств[/url]
[url=http://www.wjgl.aptekaon.in/ukrainedate-com-znakomstva.html]Ukrainedate com знакомства[/url]
[url=http://www.pcumg.aptekaon.in/vakansii-pomoshnik-parikmahera.html]Вакансии помощник парикмахера[/url]
[url=http://www.jnyj.aptekaon.in/znakomstva-krasnoarmeysk-don-obl.html]Знакомства красноармейск дон обл[/url]
[url=http://www.drff.aptekaon.in/krimskie-tatari-znakomstva.html]Крымские татары знакомства[/url]
[url=http://www.equcg.aptekaon.in/kategorii-rabot-v-elektroustanovkah.html]Категории работ в электроустановках[/url]
[url=http://www.nnh.aptekaon.in/znakomstva-omsk-jenshini.html]Знакомства омск женщины[/url]
[url=http://www.yek.aptekaon.in/znakomstva-v-kieve-slando.html]Знакомства в киеве slando[/url]
[url=http://www.gqmf.aptekaon.in/znakomstva-dlya-seksa-v-borisoglebske.html]Знакомства для секса в борисоглебске[/url]
[url=http://www.zalewiki.kedija.com/znakomstva-kazahstan-ust-kamenogorsk.html]Знакомства казахстан усть каменогорск[/url]
[url=http://www.cdh.aptekaon.in/sereznie-znakomstva-v-novosibirske.html]Серьезные знакомства в новосибирске[/url]
[url=http://www.wktn.aptekaon.in/tretyakov-vladimir-znakomstva.html]Третьяков владимир знакомства[/url]
[url=http://www.opkuu.aptekaon.in/ctg-5-3.html]Вакансии терапевта в московской области[/url]
[url=http://www.jgc.aptekaon.in/otkrovennie-foto-s-saytov-znakomstv.html]Откровенные фото с сайтов знакомств[/url]
[url=http://www.znleq.aptekaon.in/otchet-o-rabote-uchastkovogo-terapevta.html]Отчет о работе участкового терапевта[/url]
[url=http://www.uwxja.aptekaon.in/vlybilsya-v-kollegu-po-rabote.html]Влюбился в коллегу по работе[/url]
[url=http://www.bucha.kuncihost.net/samiy-nadezhniy-sayt-znakomstv.html]Самый надежный сайт знакомств[/url]
[url=http://www.xkqk.aptekaon.in/seks-znakomstva-v-chehove.html]Секс знакомства в чехове[/url]
[url=http://www.bue.aptekaon.in/ctg-5-4.html]Знакомства в сосновоборске для секса[/url]
[url=http://www.ofiw.aptekaon.in/znakomstva-v-gorode-tambove.html]Знакомства в городе тамбове[/url]
[url=http://www.jcws.aptekaon.in/znakomstvo-so-spartancami-kino-onlayn.html]Знакомство со спартанцами кино онлайн[/url]
[url=http://www.zhidachov.c0t.biz/seks-znakomstva-v-arhangelskoy-oblasti.html]Секс знакомства в архангельской области[/url]
[url=http://www.rthy.aptekaon.in/besplatnie-seks-znakomstva-v-tveri.html]Бесплатные секс знакомства в твери[/url]
[url=http://www.gajsin.amania.web.id/znakomstvo-hristian-na-invictory.html]Знакомство христиан на invictory[/url]
[url=http://www.aptz.aptekaon.in/seks-znakomstva-v-ivanovo-besplatno.html]Секс знакомства в иваново бесплатно[/url]
[url=http://www.ymfmm.aptekaon.in/analiz-raboti-metodicheskogo-obedineniya-vospitateley.html]Анализ работы методического объединения воспитателей[/url]
[url=http://www.mhsht.aptekaon.in/ctg-7-5.html]Работа в дзержинске уборщица[/url]
[url=http://www.mukex.aptekaon.in/vakansii-rostelekom-stavropol.html]Вакансии ростелеком ставрополь[/url]
[url=http://www.dunaevcy.prog-office.com/ukraina-cherkassi-znakomstva.html]Украина черкассы знакомства[/url]
[url=http://www.zrgs.aptekaon.in/seks-znakomstva-g-tolyatti.html]Секс знакомства г тольятти[/url]
[url=http://www.dsj.aptekaon.in/sayt-znakomstv-mamba-v-ijevske.html]Сайт знакомств мамба в ижевске[/url]
[url=http://www.xeddj.aptekaon.in/chasi-raboti-ashan-filion.html]Часы работы ашан филион[/url]
[url=http://www.dubljany.prog-office.com/seks-znakomstva-kotovo.html]Секс знакомства котово[/url]
[url=http://www.volnjansk.webtesto.info/galaktika-znakomstv-novaya-versiya.html]Галактика знакомств новая версия[/url]
[url=http://www.bzika.aptekaon.in/upakovshici-vakansii-v-moskovskoy-oblasti.html]Упаковщицы вакансии в московской области[/url]
[url=http://www.lnuxv.aptekaon.in/vakansii-menedjer-po-personalu-tymen.html]Вакансии менеджер по персоналу тюмень[/url]
[url=http://www.syowu.aptekaon.in/assistent-redakcii-vakansii.html]Ассистент редакции вакансии[/url]
[url=http://www.kezi.aptekaon.in/staraya-kupavna-znakomstva.html]Старая купавна знакомства[/url]
[url=http://www.joireebeind.webtesto.info/znakomstvo-so-svekrovyu.html]Знакомство со свекровью[/url]
[url=http://www.goaii.aptekaon.in/pomoshnik-administratora-salona-krasoti-vakansii.html]Помощник администратора салона красоты вакансии[/url]
[url=http://www.lmlk.aptekaon.in/seks-znakomstva-berdyansk.html]Секс знакомства бердянск[/url]
[url=http://www.galich.amania.web.id/frazi-znakomstva-na-angliyskom-yazike.html]Фразы знакомства на английском языке[/url]
[url=http://www.ojk.aptekaon.in/sereznie-znakomstva-perm.html]Серьезные знакомства пермь[/url]
[url=http://www.ekhbk.aptekaon.in/zanyatiya-posle-raboti.html]Занятия после работы[/url]
[url=http://www.wriit.aptekaon.in/ctg-5-3.html]Вакансии помощник художника москва[/url]
[url=http://www.vahrushevo.eudisofthosting.com/menyu-seks-znakomstv.html]Меню секс знакомств[/url]
[url=http://www.volnjansk.webtesto.info/virtualniy-intim-znakomstva.html]Виртуальный интим знакомства[/url]
[url=http://www.syowu.aptekaon.in/vakansii-s-predostavleniem-obshejitiya.html]Вакансии с предоставлением общежития[/url]
[url=http://www.yeje.aptekaon.in/skript-seks-znakomstv.html]Скрипт секс знакомств[/url]
[url=http://www.exjb.aptekaon.in/znakomstva-seks-mamba.html]Знакомства seks mamba[/url]
[url=http://www.bolgrad.givehosting.com/onlayn-igra-znakomstva-seks.html]Онлайн игра знакомства секс[/url]
[url=http://www.klikz.aptekaon.in/rabota-kirov-pensioneram.html]Работа киров пенсионерам[/url]
[url=http://www.vds.aptekaon.in/kiev-besplatnie-znakomstva-v-onlayne.html]Киев бесплатные знакомства в онлайне[/url]
[url=http://www.gmyh.aptekaon.in/telefoni-slujb-znakomstv.html]Телефоны служб знакомств[/url]
[url=http://www.lyvpg.aptekaon.in/kristalnaya-voda-vakansii.html]Кристальная вода вакансии[/url]
[url=http://www.grqu.aptekaon.in/seks-znakomstva-v-kstove.html]Секс знакомства в кстове[/url]
[url=http://www.ojk.aptekaon.in/znakomstva-mayl-ru-tolyatti.html]Знакомства майл ру тольятти[/url]
[url=http://www.gajvoron.webtesto.info/seks-intim-znakomstva-bez-registratsii.html]Секс интим знакомства без регистрации[/url]
[url=http://www.buryn.kuncihost.net/bar-znakomstv-skachat.html]Бар знакомств скачать[/url]
[url=http://www.ktbr.aptekaon.in/znakomstvo-dlya-podrostkov-vosmerka.html]Знакомство для подростков восьмерка[/url]
[url=http://www.ekfas.aptekaon.in/ishu-rabotu-v-ryazani-62.html]Ищу работу в рязани 62[/url]
[url=http://www.jska.aptekaon.in/24lux-ru-znakomstva-dlya-intima.html]24lux ru знакомства для интима[/url]
[url=http://www.zborov.kedija.com/klub-znakomstv-smolensk.html]Клуб знакомств смоленск[/url]
[url=http://www.gadjach.webtesto.info/znakomstva-pravoslavnie-tolyatti.html]Знакомства православные тольятти[/url]
[url=http://www.gmyh.aptekaon.in/znakomstva-v-ekaterinburge-onlayn.html]Знакомства в екатеринбурге онлайн[/url]
[url=http://www.ytds.aptekaon.in/kak-samomu-sdelat-sayt-znakomstv.html]Как самому сделать сайт знакомств[/url]
[url=http://www.galich.amania.web.id/znakomstvo-doshkolnikov-s-krugom.html]Знакомство дошкольников с кругом[/url]
[url=http://www.arghh.aptekaon.in/ishu-rabotu-shvei-v-moskve.html]Ищу работу швеи в москве[/url]
[url=http://www.zkldg.aptekaon.in/nab-chelni-rabota-vakansii.html]Наб челны работа вакансии[/url]
[url=http://www.bfhqr.aptekaon.in/chasi-raboti-primorskogo-voenkomata.html]Часы работы приморского военкомата[/url]
[url=http://www.hce.aptekaon.in/seks-znakomstva-v-primorskom-krae.html]Секс знакомства в приморском крае[/url]
[url=http://www.busk.kuncihost.net/love-sura-ru-znakomstva.html]Love sura ru знакомства[/url]
[url=http://www.szrzt.aptekaon.in/ctg-1-5.html]Отделочные работы в астрахани[/url]
[url=http://www.gorodok.teapotcosy.com/seks-znakomstva-bez-registratsii-taganrog.html]Секс знакомства без регистрации таганрог[/url]
[url=http://www.xchv.aptekaon.in/sayt-znakomstv-murmansk-seks.html]Сайт знакомств мурманск секс[/url]
[url=http://www.xoeq.aptekaon.in/besplatnie-seks-znakomstva-v-tymeni.html]Бесплатные секс знакомства в тюмени[/url]
[url=http://www.qnwt.aptekaon.in/znakomstvo-doshkolnikov-s-portretom.html]Знакомство дошкольников с портретом[/url]
[url=http://www.zpg.aptekaon.in/flirt-ru-sayt-znakomstv.html]Флирт ру сайт знакомств[/url]
[url=http://www.zhjoltyevody.c0t.biz/seks-znakomstva-v-slavgorode.html]Секс знакомства в славгороде[/url]
[url=http://www.tvsxt.aptekaon.in/sposobi-vedeniya-stroitelnih-rabot.html]Способы ведения строительных работ[/url]
[url=http://www.nkruo.aptekaon.in/gotovie-kontrolnie-raboti-po-menedjmentu.html]Готовые контрольные работы по менеджменту[/url]
[url=http://www.kvf.aptekaon.in/http-love-znakomstva.html]Http love знакомства[/url]
[url=http://www.jska.aptekaon.in/ctg-1-3.html]Знакомства город лесной[/url]
05.12.2011 23:35
Земля – это планета невероятной красоты, где каждый уголок по-своему прекрасен и таинственен, будь то созданное природой место или построенный человеком мегаполис. Места, которые непременно стоит увидеть, можно перечислять очень долго. Но кроме мест есть в мире и множество интересных событий, традиций и просто фактов, благодаря которым хочется посетить именно эту страну, город, поселение или местность.
Блог «С миру по нитке» посвящен именно таким удивительным местам.
[url=http://aroundoftheworld.ru/china/puteshestvie-v-guanchzhou.html]гуанчжоу[/url]
[url=http://aroundoftheworld.ru/japan/cosplay.html]кальян фото[/url]
[url=http://aroundoftheworld.ru/yuzhnye-strany/pustynya-atakama-v-drugom-izmerenii.html]пустыня атакама[/url]
[url=http://aroundoftheworld.ru/japan/prazdnik-fonarejj-v-yaponii.html]праздники в японии[/url]
09.12.2011 18:09
И я его [url=http://tips2sports.com/]нашел[/url]
К стати там еще есть полно прогнозов с платников, участники пишут абсолютно бесплатно и причем каждый день.
[url=http://tips2sports.com/]спорт сегодня футбол
[/url]
есть как наши так и иностранные каперы, примерно: darksoccertips, bestpropicks, snipersoccer, cinemasoccer, betswinner, getandwin, goldentips, blacksoccertips, theblackbetting, 1tipster, hc-tips, soccersmoney, jackpotsoccertips, guaranteetip, steeltips, lucky-tips, bestasiantips, sportingboss, soccerbuck, blacksoccertips, secretbettingtips, darksoccertips, betteam, bettingsqueeze, sokeros и др.
Форум пока еще молодой, и мало раскрученный, только с одной стороны это даже +
В общем все кто увлекается или в курсе данной темой советую.
..там к стати вдобавок устраивают проверки.. разных каперов и тоже на халяву.
[url=http://tips2sports.com/]продолжение...[/url]
14.12.2011 15:12
16.12.2011 22:29
Это мужской сайт, где мнение мужчины имеет абстрактный вид. А мысли о жизни и жизненный опыт позволяют писать
советы мужчинам.
Акцентируя внимание на такие темы: жизнь, психология, гендерные отношения и, конечно же, секс - автор направляет свой
внутренний взгляд к тебе, -настоящий мужчина.
[url=http://sweatego.ru/sex/seks-bez-prezervativa/]без презерватива[/url]
[url=http://sweatego.ru/prikladnaya-psixologiya/8-sposobov-samomotivacii-ili-samorazvitie-lichnosti/]самомотивация к учебе[/url]
[url=http://sweatego.ru/eksperimenty/vsya-pravda-o-sigaretax-eksperiment-o-vrede-kureniya/]вся правда о курении[/url]
[url=http://sweatego.ru/]мужские сайты[/url]
04.01.2012 05:02
home part-time then this is the most important email you’re ever
going to read.
Here’s why:
“Businesses need ME! They’re paying me money – CASH – to a
36-year-old work-at-home mother to get my opinion.”
http://get-money-for-survey.info
Guess what?
They also need YOU!
I’m not a marketing expert or a sales gal. In fact, I know very
little about business. But I do know exactly what I like and what
I don’t like. I know what products I would buy and what services
I would use.
Guess what? This is exactly what large companies are paying me
for. They need to know what their average customer needs and
wants. So these companies pay millions of dollars every month to
the average person. In return, the average person, myself
included, answers some questions and gives them their opinion.
You’ve got to try this out. Just click on the link below and
check it out yourself.
http://get-money-for-survey.info
14.01.2012 12:47
15.01.2012 07:21
17.01.2012 18:59
Магазин Горящих Путевок - это сеть туристических агентств, которая занимает первые места на туристическом рынке. Мы можем предложить своим клиентам горячие туры и путевки из Санкт-Петербурга на любой вкус. У нас всегда есть горячие туры из Санкт-Петербурга в Египет, Турцию, Тунис, ОАЭ, Тайланд и другие. Автобусные туры из Санкт-Петербурга в разные города и страны мира по самым низким ценам позволят сэкономить ваши денежные средства. Наши профессиональные менеджеры турфирмы помогут Вам выбрать лучшие туры от лучших операторов
[url=http://mgpsp.ru/18-vengriya.html]горя туры[/url]
[url=http://mgpsp.ru/sp/230-novogodnyaya-noch-v-prage-8-dney-programma-zdes.html]горящие путевки витебск[/url]
[url=http://mgpsp.ru/about.html]горящие путевки tez[/url]
[url=http://mgpsp.ru/about.html]горящие туры нева[/url]
18.01.2012 17:06
m odnoklassniki ru dk
вконтакте удалить аккаунт
http://abrmpyt.hostingsociety.com/bezlimitnyj-internet-bilajn-opera-mini.html безлимитный интернет билайн опера мини
vk com login ph
мой мир интернет магазин
http://ikpsjhv.hostingsociety.com/http-shadow-jimm-org.html http shadow jimm org
vk com internatyra
вконтакте закрыт доступ
http://hlgzqyy.hostingsociety.com/konstruktor-jimm-dlja-fly.html конструктор jimm для fly
мир википедия
рисовалка граффити вконтакте
http://mretgem.hostingsociety.com/besplatno-jimm-konstruktor-dlja-kpk.html бесплатно jimm конструктор для кпк
статусы odnoklassniki ru
словарь паролей вконтакте
http://sdughnb.hostingsociety.com/opera-mini-dlja-korbi.html опера мини для корби
http vkontakte ru profile php ver mail ru vkontakte социальная сеть www odnoklassniki am maill agent ru однотрахники com история древнего мира скачать заригистрироваца в mail ru http vkontakte ru friends id odnoklassniki ru форум
07.02.2012 21:17
Психология на Psydom.ru – ваш верный помощник
Добро пожаловать на наш сайт! У нас полезную для себя информацию смогут найти люди любых возрастов и профессий: школьники, студенты, родители, педагоги, психологи. На наших страничках вы лучше узнаете о том, что такое психология, как знание этой науки помогает в жизни. Материалы нашего ресурса включают в себя описание известных психологических методик, упражнения, которые способствуют развитию различных навыков, а также памяти, внимания, мышления. Всё это можно узнать благодаря полезным ссылкам, которые мы вам предложим.
[url=http://psydom.ru/articles/eto-dolzhen-znat-kazhdyj-pravila-povedeniya-v-tolpe/]правила поведения в толпе в помещении[/url]
[url=http://psydom.ru/page/teoriya-polya-kurta-levina]поле сил курта левина[/url]
[url=http://psydom.ru/articles/vzaimosvyaz-psihologii-s-drugimi-naukami-pomozhet-cheloveku-poznat-sebya-lu/]взаимосвязи психоанализа с другими науками[/url]
[url=http://psydom.ru/forum]психологический форум[/url]
07.02.2012 21:34
18.02.2012 13:28
20.02.2012 23:52
04.03.2012 22:53
05.03.2012 15:36
Условия на сайте.
http://1541.ru
03.04.2012 09:21
20.10.2012 04:24